1、定標(biāo)的意義
定標(biāo)就是要找出一個(gè)參考點(diǎn),就是一個(gè)K值(或F值)。它是由儀器和試劑狀態(tài)確定下來的。當(dāng)我們測(cè)定一個(gè)標(biāo)本時(shí),無論你是用手工的方法或全自動(dòng)生化分析儀,測(cè)出來的值只是一個(gè)吸光度,這個(gè)吸光度對(duì)我們沒有什么意義,我們要把這個(gè)吸光度轉(zhuǎn)換成一個(gè)濃度或酶的活性。那就要乘上一個(gè)K值,計(jì)算并打印出來的結(jié)果對(duì)我們就有意義了。K值就是我們通過定標(biāo)找出來的。一般上最低要求是有試劑空白與標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)過儀器測(cè)定出兩個(gè)吸光度:
K=(標(biāo)準(zhǔn)濃度-試劑空白)/(A標(biāo)準(zhǔn)-A試劑空白)
(試劑空白通常為0)
標(biāo)準(zhǔn)液的濃度我們是知道的,這兩個(gè)吸光度可以由儀器測(cè)出,這樣就得出了一個(gè)K值。無論什么樣的標(biāo)本,用其吸光度乘以K值我們就得到的答案。因此K值具有非常決定性的意義,可以決定標(biāo)本的準(zhǔn)確性。
2、K值的決定因素
我們看看K值會(huì)受到什么影響呢?第一,標(biāo)準(zhǔn)液的濃度一定要準(zhǔn)確(標(biāo)準(zhǔn)液最好與標(biāo)本一樣用血清為基質(zhì)的)第二,標(biāo)準(zhǔn)液的的吸光度與試劑空白的吸光度一定要準(zhǔn)確。吸光度受儀器狀況、試劑狀況的影響。如果你的儀器相當(dāng)穩(wěn)定,試劑是影響K值的一個(gè)主要因素。
3、如何確定K值是正確的?
我們一般用質(zhì)控血清來檢查,最好是兩種水平的質(zhì)控血清來檢查。如果質(zhì)控結(jié)果很好,可以說K值是準(zhǔn)確的。用這個(gè)K值計(jì)算出來病人的結(jié)果也是準(zhǔn)確的,所以K值非常關(guān)鍵。
4、K值的真面目
K值實(shí)際上代表了斜率,截距代表了試劑空白,試劑空白每天都在變化,所以K值的穩(wěn)定性決定您的儀器與試劑,如果儀器與試劑都很穩(wěn)定,那K值也很穩(wěn)定。
5、多長(zhǎng)時(shí)間定一次標(biāo)合適?
這要看您試劑的穩(wěn)定性,質(zhì)控結(jié)果不好,有些項(xiàng)目做試劑空白可以解決,有些項(xiàng)目需要做兩點(diǎn)定標(biāo)。
6、是否每天定標(biāo)就能保證結(jié)果穩(wěn)定?
不一定,可能您在定標(biāo)時(shí)并不是每天都新溶解定標(biāo)液,因?yàn)槎?biāo)液復(fù)溶后有一些項(xiàng)目不穩(wěn)定,比如:TBIL、DBIL(見光分解)、GLU(細(xì)菌分解)、酶項(xiàng)目(冰凍后復(fù)溶降解)。解決方法:以上項(xiàng)目在定標(biāo)時(shí)一定要新溶解一瓶定標(biāo)液,至少溶解30分鐘,在1小時(shí)內(nèi)測(cè)定完成。